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Caracterización de FpaD, un posible represor general de genes de transportadores de aminoácidos de Aspergillus nidulans

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Proyecto ANII-FCE modalidad I: En los hongos, los aminoácidos son precursores de la biosíntesis de proteínas pero además pueden utilizarse como fuente de nitrógeno y carbono. La incorporación de éstos a la célula ocurre a través de transportadores o permeasas específicas presentes en la membrana plasmática. El trabajo con hongos modelo como Saccharomyces cerevisiae y Aspergillus nidulans ha permitido la caracterización estructural y funcional de varios de estos transportadores, algunos generales, otros especializados en un determinado aminoácido. Se conocen además varios aspectos de la regulación de la expresión de estos transportadores que implican mecanismos que operan a nivel transcripcional y post-transcripcional. En este proyecto proponemos caracterizar un posible represor de la transcripción de genes que codifican para estas permeasas de A. nidulans, FpaD, identificado por métodos genéticos. Éste participaría de un mecanismo de regulación general de estos genes no descrito previamente, presente exclusivamente en Aspergillus, Penicillium y otros Eurotiomycetes. En FpaD se predicen varios dominios de unión al ADN de diferentes tipos (un homeodominio y tres dedos de Zn). Se verificará su rol como represor, se identificarán sus genes blanco y se llevará a cabo una caracterización exhaustiva de sus sitios de unión en las regiones reguladoras de éstos. Asimismo, se investigará la relevancia funcional de los diferentes dominios de unión al ADN identificados, así como de señales de localización nuclear predichas. Finalmente, se explorará el rol de una pequeña región transcripta identificada corriente arriba de fpaD y que parece ser necesaria para su correcta regulación o función.